مقایسه روش های مختلف استخراج rna کل از سه گونه آویشن غنی از ترکیبات فنولی و متابولیت های ثانویه

نویسندگان

سمیه بهادر

بابک ربیعی

سید حسن حسنی کومله

چکیده

گیاهان دارویی منبع غنی از مواد مؤثره برای تولید فراورده­های دارویی هستند. جنس آویشن (thymus) متعلق به خانواده نعناعیان است که بیش از 18 گونه آن در نواحی مختلف ایران پراکنش دارند. اثرات دارویی این گیاه مربوط به ترکیبات مختلف ازجمله مونوترپن­های فنولی کارواکرول و تیمول است، اما این ترکیبات فنولی و متابولیت­های ثانویه دیگر به­عنوان مشکل اصلی استخراج rna مناسب برای تجزیه و تحلیل بیان ژن و مهندسی ژنتیک محسوب می­شوند. هدف از انجام این پژوهش، مقایسه روش­های مختلف استخراج rna و معرفی یک روش مناسب جهت استخراج rna  از سه گونه آویشن غنی از ترکیبات فنولی بود. ازاین­رو، هفت دستورالعمل استخراج rna شامل سه روش، دو کیت و دو بافر تجاری استخراج  rnaاز نظر کمیت و کیفیت rna استخراج شده، ارزیابی و مقایسه شدند. به منظور ارزیابی کمیت و کیفیت rna از خواندن جذب در طول موج 260، 280 و 230 نانومتر، محاسبه نسبت جذب 280/260 و 230/260، الکتروفورز ژل آگارز، واکنش­های rt-pcr و real-time pcr استفاده شد. از بین روش­های مورد مطالعه، کمیت و کیفیت rnaی استخراج شده با روش فنل/ sdsنسبت به روش­های دیگر ازجمله trizol® برای هر سه گونه ­آویشن مناسب­تر بود. از محاسن این روش کوتاه بودن زمان استخراج و ساخت دستی بافر اشباع با تریس بود که در گزارش­های قبلی به­شکل آماده خریداری شده است. در نهایت، روش فنل/ sds تغییریافته برای استخراج  rnaاز برگ­های غنی از ترکیبات فنولی آویشن معرفی شد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

مقایسه روش‌های مختلف استخراج RNA کل از سه گونه آویشن غنی از ترکیبات فنولی و متابولیت‌های ثانویه

گیاهان دارویی منبع غنی از مواد مؤثره برای تولید فراورده­های دارویی هستند. جنس آویشن (Thymus) متعلق به خانواده نعناعیان است که بیش از 18 گونه آن در نواحی مختلف ایران پراکنش دارند. اثرات دارویی این گیاه مربوط به ترکیبات مختلف ازجمله مونوترپن­های فنولی کارواکرول و تیمول است، اما این ترکیبات فنولی و متابولیت­های ثانویه دیگر به­عنوان مشکل اصلی استخراج RNA مناسب برای تجزیه و تحلیل بیان ژن و مهندسی ژن...

متن کامل

مقایسه سه روش استخراج RNA از پوست میوه انار

سابقه و هدف: استخراج RNA‌ی با کمیت و کیفیت مطلوب از نیاز‌های بنیادی زیست شناسی مولکولی است. جداسازی RNA از بافت‌‌های گیاهان چوبی به علت حضور مقادیر زیادی از کربوهیدارات‌ها، تانن‌ها و ترکیبات پلی فنولی با مشکلاتی روبروست. بنابراین دستیابی به یک روش استخراج مناسب که بتواند RNA‌ی کیفی مطلوبی را تولید کند، از اهمیت بالایی برخوردار است. مواد و روش‌ها: در این تحقیق سه روش استخراج RNA شامل: 1- زارعی...

متن کامل

جداسازی متابولیت های ثانویه طی فرایند استخراج dna از گیاه آویشن و آنالیز آن ها با روش gc-mass

استخراج dna ژنومی با کیفیت و کمیت مطلوب از نیازهای بنیادی فن¬های مولکولی زیستی مختلف است. در بعضی تحقیقات به دلایل مختلفی نمونه¬های گیاهی مورد مطالعه از طبیعت جمع¬آوری می¬شود که این گیاهان معمولاً خشبی بوده و استخراج dna از بافت گیاهی این نمونه¬ها به علت وجود کربوهیدرات¬ها، ترکیبات پلی¬فنلی و پروتئین¬ها با مشکلاتی روبرو است. بویژه آنکه این ترکیبات به شکل کمپلکس با اسیدهای نوکلئیک ترکیب می¬شوند و...

متن کامل

مقایسه سه روش استخراج rna از پوست میوه انار

سابقه و هدف: استخراج rna ی با کمیت و کیفیت مطلوب از نیاز های بنیادی زیست شناسی مولکولی است. جداسازی rna از بافت های گیاهان چوبی به علت حضور مقادیر زیادی از کربوهیدارات ها، تانن ها و ترکیبات پلی فنولی با مشکلاتی روبروست. بنابراین دستیابی به یک روش استخراج مناسب که بتواند rna ی کیفی مطلوبی را تولید کند، از اهمیت بالایی برخوردار است. مواد و روش ها: در این تحقیق سه روش استخراج rna شامل: 1- زارعی و ...

متن کامل

The effect of cyclosporine on asymmetric antibodies and serum transforming growth factor beta1 in abortion-prone model of mice CBA/J x DBA/2

كچ ي هد فده و هقباس : ي ک ي طقس زورب للع زا اه ي ،ررکم ا لماوع تلاخد ي ژولونوم ي ک ا رد ي ن قم طققس عون ي وراد دقشاب ي س ي روپسولک ي ،ن ح لدم رد طقس شهاک بجوم ي ناو ي CBA/j×DBA/2 م ي تنآ ددرگ ي داب ي اه ي ان و راققتم TGF-β لماوع زا عت مهم يي ن گلماح تشونرس هدننک ي سررب روظنم هب رضاح هعلاطم تسا ي ات ث ي ر اس ي روپسولک ي ن م رب ي از ا ي ن تنآ عون ي داب ي س و اه ي اکوت ي ن TGF...

متن کامل

استخراج DNA از گونه های ماکرو جلبکی حاوی میزان بالای ترکیبات پلی ساکاریدی و فنولی جهت مطالعات ژنتیکی

استخراج DNA خالص و کافی از ماکرو جلبک‌ها به علت دارا بودن رنج وسیعی از متابولیت­های ثانویه، نحوه اشتباه نمونه­برداری و خصوصیات مرفولوژی کی آن‌ها، معمولاً مشکل است. ازآنجاکه استخراج DNA خالص جهت مطالعات مولکولی از اهمیت ویژه­ای برخوردار است این ­مطالعه باهدف استخراج آسان و ارزان DNA ژنومی باکیفیت و کمیت بالا از نمونه­های ماکرو جلبکی انجام شد. استخراج DNA توسط روش­های فنول-کلروفرم، CTAB و CTAB تغی...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
دو فصلنامه تحقیقات ژنتیک و اصلاح گیاهان مرتعی و جنگلی ایران

ناشر: مؤسسه تحقیقات جنگلها و مراتع کشور

ISSN 1735-0891

دوره 22

شماره 1 2014

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023